Innholdsfortegnelse:

Hvordan laster du gelelektroforese?
Hvordan laster du gelelektroforese?

Video: Hvordan laster du gelelektroforese?

Video: Hvordan laster du gelelektroforese?
Video: Gel Electrophoresis 2024, November
Anonim

Laste inn prøver og kjøre en agarosegel:

  1. Legge til lasting buffer til hver av DNA-prøvene dine.
  2. Når stivnet, plasser agarosen gel inn i det gel boks ( elektroforese enhet).
  3. Fylle gel boks med 1xTAE (eller TBE) til gel er dekket.
  4. Forsiktig laste en molekylvektstige inn i den første banen av gel .

I forhold til dette, hvor mye DNA trenger du å laste for gelelektroforese?

Mengden DNA å laste per brønn er variabel. Den minste mengden av DNA som kan påvises med ethidumbromid er 10 ng. DNA mengder på opptil 100 ng per brønn vil resultere i et skarpt, rent bånd på etidiumbromidfarget gel.

I tillegg, hvorfor brukes buffer i gelelektroforese i stedet for vann? De buffer er nødvendig for å opprettholde pH i DNA-løsningen på nær nøytralt nivå, fordi hvis den kan bli sur gjennom elektrolyse. De elektriske strømmene forårsaket av elektrodene kan forårsake vann molekyler for å dissosiere og frigjøre H+-ioner.

Folk spør også hvorfor en markør brukes i gelelektroforese?

Mindre fragmenter beveger seg raskere, og derfor lenger, enn større fragmenter når de slanger seg gjennom gel . Hvorfor brukes en markør når du kjører fragmentene gjennom gel ? EN markør inneholder DNA-fragmenter av kjent størrelse. Markører kjøres i hver gel for sammenligning med de ukjente fragmentene i andre gel baner.

Hvor mye DNA kan sees på en agarosegel?

Mest agarose geler er laget mellom 0,7% og 2%. 0,7 % gel vil vise god separasjon (oppløsning) av store DNA fragmenter (5–10 kb) og en 2 % gel vil viser god oppløsning for små fragmenter (0,2–1 kb).

Anbefalt: