Innholdsfortegnelse:

Hvordan finner du konsentrasjonen av DNA fra absorbans?
Hvordan finner du konsentrasjonen av DNA fra absorbans?

Video: Hvordan finner du konsentrasjonen av DNA fra absorbans?

Video: Hvordan finner du konsentrasjonen av DNA fra absorbans?
Video: How to calculate DNA concentration in Excel from absorbance reading 2024, November
Anonim

DNA-konsentrasjon estimeres ved å måle absorbans ved 260nm, justere A260 måling for turbiditet (målt ved absorbans ved 320nm), multiplisere med fortynningsfaktoren, og bruke forholdet som en A260 på 1,0 = 50 ug/ml rent dsDNA.

På samme måte spør folk, hvordan finner du konsentrasjonen av DNA?

For å bestemme konsentrasjonen av DNA i den opprinnelige prøven, utfør følgende beregning:

  1. dsDNA-konsentrasjon = 50 μg/mL × OD260 × fortynningsfaktor.
  2. dsDNA-konsentrasjon = 50 μg/ml × 0,65 × 50.
  3. dsDNA-konsentrasjon = 1,63 mg/ml.

Dessuten, hva er en god DNA-konsentrasjon? EN god kvalitet DNA prøven skal ha en A260/EN280 forhold på 1,7-2,0 og en A260/EN230 forhold på over 1,5, men siden følsomheten til forskjellige teknikker for disse forurensningene varierer, bør disse verdiene kun tas som en veiledning for renheten til prøven.

Absorberer DNA på denne måten ved 280 nm?

Absorbansforholdet ved 260 nm vs 280 nm er ofte brukt til å vurdere DNA forurensning av proteinløsninger, siden proteiner (spesielt de aromatiske aminosyrene) absorbere lys kl 280 nm.

Hvordan bruker du NanoDrop for DNA-konsentrasjon?

I utgangspunktet nanodrop gir deg muligheten til å velge DNA , RNA, proteiner. Du må velge DNA , plasser deretter 2 ΜL vann (mili Q preferent) velg "Blank" etter det plasser ytterligere 2 ΜL vann for å bekrefte at målet er 0. Plasser deretter 2 ΜL av prøven. Du vil få målingen.

Anbefalt: