Finnes det andre metoder for å rense PCR-produkter?
Finnes det andre metoder for å rense PCR-produkter?

Video: Finnes det andre metoder for å rense PCR-produkter?

Video: Finnes det andre metoder for å rense PCR-produkter?
Video: Смерть в отеле: Что произошло с девушкой, которую никто не знал? 2024, November
Anonim

For de applikasjonene som krever PCR opprydding eller validering av PCR resultater, der er to metoder generelt fulgt: PCR-produkt isolasjon ved bruk av en kolonne og gel rensing fra en agarosegel.

Her, hvilken type kromatografi brukes for å rense PCR-produkter?

For å rense PCR-produktene brukes størrelseseksklusjonskromatografi. Dette fanger små molekyler som protein, primere , og nukleotider mens store molekyler som PCR-produkter er for store til å gå inn i kulene og passere gjennom kolonnen inn i oppsamlingsrørene.

Dessuten, hvordan renser du DNA? I utgangspunktet kan du rense din DNA prøver ved å lysere celle- og/eller vevsprøver ved å bruke den mest passende prosedyren (mekanisk forstyrrelse, kjemisk behandling eller enzymatisk fordøyelse), isolere nukleinsyrene fra forurensningene og utfelle dem i en passende bufferløsning.

I tillegg, hvorfor renser vi PCR-produkt?

Rensing av DNA fra en PCR reaksjon er vanligvis nødvendig for nedstrøms bruk, og letter fjerning av enzymer, nukleotider, primere og bufferkomponenter. Vanlig brukte metoder benytter spinnkolonner som inneholder en silikamatrise som DNA selektivt kan bindes til i nærvær av kaotropiske salter.

Hvorfor må DNA renses?

Vi ren opp DNA fra vandige løsninger for å fjerne buffersalter, enzymer eller andre stoffer som kan påvirke nedstrømsapplikasjoner. Eksempler inkluderer PCR-reaksjon ren opp, ren opp etter restriksjon fordøyer og ren opp av genomisk eller plasmid DNA forurenset med cellulære proteiner/rester.

Anbefalt: