Hvorfor må spektrofotometeret stilles inn på en bestemt bølgelengde?
Hvorfor må spektrofotometeret stilles inn på en bestemt bølgelengde?

Video: Hvorfor må spektrofotometeret stilles inn på en bestemt bølgelengde?

Video: Hvorfor må spektrofotometeret stilles inn på en bestemt bølgelengde?
Video: Thomas Campbell: Ego, Paranormal Psi, My Big TOE 2024, November
Anonim

Når du justerer bølgelengde på en spektrofotometer , du er endre posisjonen til prismet eller diffraksjonsgitteret slik at forskjellig bølgelengder av lys er rettet mot spalten. Jo mindre spaltebredden er, desto bedre er instrumentets evne til å løse ulike forbindelser.

Derav, ved hvilken bølgelengde vil spektrofotometeret bli satt?

Avhengig av bølgelengdeområdet til lyskilden, kan det klassifiseres i to forskjellige typer: UV-synlig spektrofotometer: bruker lys over det ultrafiolette området (185 - 400 nm) og det synlige området (400 - 700 nm ) av elektromagnetisk strålingsspektrum.

På samme måte, hvorfor trenger du å kalibrere spektrometeret hver gang du endrer bølgelengden? Spektrofotometer må være kalibrert mot en blank løsning så at målinger etter den kan bruke blindløsningens absorbans som nullreferanse. Et mål på kapasiteten til et stoff til å absorbere lys av en spesifisert bølgelengde.

ved hvilken bølgelengde bør avlesningene tas?

Ta avlesninger med 5 nm mellomrom litt før og etter dette bølgelengde . For eksempel, hvis maksimal absorbans ble funnet ved 450 nm, så for å få en mer nøyaktig lesning av λmax, ta absorbans avlesninger ved 440, 445, 455 og 460 nm.

Hvorfor måler du absorbansen til løsningen ved 550 nm?

Proteiner reagerer med kobberioner i alkalisk løsning å danne et fiolettfarget kompleks som absorberer lys kl 550 nm . Derfor, ved måling konsentrasjonen av komplekset, ved bruk av A550 ( Absorbans på 550 nm ), du er også måling konsentrasjonen av protein.

Anbefalt: